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 * 文章主題： 毛氈苔組織培養失敗   本文章有問題，傳送短訊息報告給版主  加到我的最愛&關注本文章  顯示可列印的版本  把本文章加到我的最愛   
n124553 




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 有毛氈苔組培經驗的大大請教一下，
小弟最近取毛氈苔葉子來做組織培養一直失敗
看來都是殺菌不完全，使得2-3天後就發霉
我想是葉子上的毛使得殺菌不徹底，
小弟的消毒做法如下：
1 取下葉子後用75%的酒精泡20秒
2 再用2%漂白水泡10分鐘(預泡500ml 加幾滴 tween 80)
泡太久葉子可能會褐化，（長毛又脆弱真難搞），不知這樣的消毒夠嗎?
3 移入先噴過漂白水的操作箱中
4 用火燒過夾子等物品後，從試管取出葉子，將切口再切掉一點(之前這裡常發霉)
5 用夾子夾住傷口處，用無菌水直接沖洗數次
6 直接丟到培養瓶中(夾子沒碰到瓶口)，快速封好
7 發霉(悶呀)

後來上網看到外植體消毒要配合超音波清洗機較乾淨
所以又買了一台回來玩
沒想到震個20秒不到 葉子就出現破洞狀，太猛了，後來停止
泡足10分，跑上述流程還是發霉，(沒泡酒精，感覺酒精太強)
不知失敗在那，難道是試管跟橡膠蓋子沒用火燒過嗎?
想說泡漂白水了所以就沒額外殺菌了
不知各位大大有何高見?









發表文章時間2007/06/17 09:26pm　IP: 已設定保密[本文共 853 位元組]　 
csyin 
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 用葉子作為培殖體...很難...
如果沒事先把植物移到比較乾淨的環境栽培,
那樣長出來的葉子都沾滿了黴菌孢子,
而孢子對殺菌處理的耐受度很高...

用種子會比較簡單...







發表文章時間2007/06/17 09:30pm　IP: 已設定保密[本文共 163 位元組]　 
n124553 




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 真的嗎?難道真的無法成功?

另外請教csyin 大大，
毛氈苔的種子那麼小要如何殺菌?小到快看不見了
是用長玻璃吸管來操作嗎?
消毒流程法大概如何呢?
謝謝!








發表文章時間2007/06/17 10:12pm　IP: 已設定保密[本文共 160 位元組]　 
csyin 
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 那個種子的消毒方法沒什麼特別的啊!
就照平常的做法就好了...
種子用滴管吸起來就好了.

另外, 我沒說葉子一定做不出來,
問題是在於前處理做得好不好而已...
再來就是如果做的量夠多,
用瓶海戰術, 總會做出一瓶無菌的吧...XD







發表文章時間2007/06/17 10:26pm　IP: 已設定保密[本文共 224 位元組]　 
n124553 




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 也就是說用葉子做
失敗率很高就對了!








發表文章時間2007/06/17 10:40pm　IP: 已設定保密[本文共 41 位元組]　 
db170717 
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下面引用由n124553在 2007/06/17 10:12pm 發表的內容：
真的嗎?難道真的無法成功?
另外請教csyin 大大，
毛氈苔的種子那麼小要如何殺菌?小到快看不見了
是用長玻璃吸管來操作嗎?
...


毛氈苔無菌播種其實很簡單
只要用到很容易拿到ㄉㄧ樣小東西~~濾紙
用濾紙把種子包起來
再用迴紋針夾住
一起丟到漂白水裡殺菌
最後用夾子把種子夾進瓶裡
這樣過程應該夠清楚了吧!
PS.用吸管吸種子常會發生種子黏在吸管裡ㄉ情形
     到時是要放棄種子還是要為了那一兩顆種子奮鬥?
     用濾紙就可以避免,而且濾紙是白色ㄉ,種子就一覽無遺
     其他ㄉ食蟲植物也可以比照辦理喔!







發表文章時間2007/06/17 10:46pm　IP: 已設定保密[本文共 663 位元組]　 
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 db170717  大大 這招高呀!
但是用夾子應還是很難夾吧!
用解剖針會不會較容易呢？







發表文章時間2007/06/17 11:10pm　IP: 已設定保密[本文共 86 位元組]　 
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下面引用由n124553在 2007/06/17 11:10pm 發表的內容：
db170717  大大 這招高呀!
但是用夾子應還是很難夾吧!
用解剖針會不會較容易呢？


好啦,最終絕招
如果種子真ㄉ太小
用刀子將有種子ㄉ濾紙割一小塊
用夾子夾進培養瓶裡
在培養基上沾一沾
PS.噓~~~~目前為止很少失敗,只跟你說,不要告訴別人喔!







發表文章時間2007/06/17 11:26pm　IP: 已設定保密[本文共 354 位元組]　 
playerst 
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下面引用由db170717在 2007/06/17 11:26pm 發表的內容：
好啦,最終絕招
如果種子真ㄉ太小
用刀子將有種子ㄉ濾紙割一小塊
用夾子夾進培養瓶裡
...


噓~跟你說喔~我們都已經知道了....








發表文章時間2007/06/17 11:50pm　IP: 已設定保密[本文共 230 位元組]　 

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